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腫瘤微環(huán)境 (Tumor Microenviroment, TME)，由腫瘤細胞、免疫細胞、血管內皮細胞、脂肪細胞以及成纖維細胞等多種基質細胞，細胞因子、趨化因子等可溶性成分，還包括代謝產(chǎn)物等共同組成的局部環(huán)境，為腫瘤提供營養(yǎng)支持。為了使抗腫瘤免疫反應有效殺死腫瘤細胞，必須啟動一系列事件，并允許其反復進行和擴展，我們稱之為腫瘤免疫循環(huán)。腫瘤免疫循環(huán)共包括七個關鍵步驟，涉及腫瘤免疫的不同環(huán)節(jié)，也是理解腫瘤免疫治療的關鍵。
腫瘤細胞：腫瘤細胞標志物的選擇需結合腫瘤類型、研究目的（如腫瘤分型、增殖活性、侵襲能力評估等），核心是特異性識別腫瘤細胞，以區(qū)分于微環(huán)境中的免疫細胞、基質細胞、血管內皮細胞等。
一、通用腫瘤細胞標志物（適用于多數(shù)實體瘤）
這類標志物不依賴特定腫瘤類型，通過識別腫瘤細胞的 “共性特征"（如上皮來源、增殖活性、核特征）定位腫瘤細胞，常用于未知腫瘤分型初篩、腫瘤區(qū)域界定。
標志物 | 靶點 / 機制 | 適用場景 | 注意事項 |
Pan-CK | 廣譜細胞角蛋白（Cytokeratin） | 識別上皮來源腫瘤（如肺癌、乳腺癌、結直腸癌），區(qū)分上皮腫瘤與間葉來源腫瘤（如肉瘤） | 非上皮腫瘤（如淋巴瘤、黑色素瘤）不表達，需結合其他標志物排除 |
CK7/CK20 | 細胞角蛋白 7/20（亞型組合） | 上皮腫瘤分型（如 CK7+/CK20 + 提示結直腸癌，CK7+/CK20 - 提示肺癌 / 乳腺癌） | 需聯(lián)合檢測，單一標志物特異性低 |
Ki-67 | 增殖相關核抗原 | 評估腫瘤細胞增殖活性（指數(shù)越高，惡性程度可能越高） | 需與腫瘤特異性標志物（如 Pan-CK）共染，排除非腫瘤細胞增殖 |
p53 | 抑癌基因產(chǎn)物（突變型為主） | 提示腫瘤細胞的 p53 基因突變狀態(tài)（如結直腸癌、卵巢癌中突變型 p53 高表達） | 野生型 p53 表達弱且不穩(wěn)定，需結合陰性對照判斷 |
二、腫瘤類型特異性標志物（按癌種分類）
這類標志物僅在特定腫瘤中高表達，是精準定位目標腫瘤細胞、區(qū)分不同癌種的核心，需根據(jù)研究的腫瘤類型選擇，常見如下：
腫瘤類型 | 核心特異性標志物 | 輔助標志物（排除 / 分型） | 應用說明 |
肺癌 | - TTF-1（肺腺癌） | CK7、CK5/6（鱗癌）、CD56（小細胞癌） | TTF-1 陰性不能排除肺腺癌（約 10% 陰性），需聯(lián)合 Napsin A |
乳腺癌 | - ER（雌激素受體） | GATA3、CK7（區(qū)分乳腺與其他上皮癌） | HER2 需注意 “膜陽性" 判讀標準，ER/PR 用于分型（激素受體陽性型） |
結直腸癌 | - CDX2（腸道特異性轉錄因子） | CK20、Ki-67（增殖評估） | CDX2 在胃癌中也可能弱表達，需結合臨床背景 |
黑色素瘤 | - S-100（神經(jīng)嵴來源標志物） | SOX10（輔助確認）、Pan-CK（排除上皮癌） | S-100 特異性低（神經(jīng)鞘瘤也表達），需聯(lián)合 HMB-45/Melan-A |
淋巴瘤 | - CD20（B 細胞淋巴瘤） | PAX5（B 細胞核標志物）、Ki-67（增殖） | 需與 “反應性淋巴細胞" 區(qū)分，常聯(lián)合免疫細胞標志物（如 CD4/CD8） |
前列腺癌 | - PSA（前列腺特異性抗原） | CK8/18（上皮確認）、p63（排除基底細胞） | PSMA 在轉移灶中表達更穩(wěn)定，優(yōu)于 PSA |
卵巢癌 | - CA125（漿液性卵巢癌） | CK7、PAX8（輔助確認上皮來源） | CA125 在子宮內膜癌中也表達，需聯(lián)合 WT1 |
三、腫瘤細胞功能相關標志物（評估侵襲、代謝、耐藥）
這類標志物不直接 “識別" 腫瘤細胞，而是結合腫瘤特異性標志物（如 Pan-CK）共染，用于分析腫瘤細胞的生物學行為，常見于機制研究（如腫瘤侵襲、免疫逃逸、藥物耐藥）。
功能方向 | 標志物 | 作用機制 | 適用場景 |
侵襲轉移 | MMP-9 | 基質金屬蛋白酶 9，降解細胞外基質，促進侵襲 | 結直腸癌、乳腺癌等轉移相關研究 |
Vimentin | 波形蛋白（上皮 - 間質轉化標志物） | 評估腫瘤細胞 EMT 過程（如肺癌、胰腺癌） | |
免疫逃逸 | PD-L1 | 程序性死亡配體 1，結合 T 細胞 PD-1 抑制免疫殺傷 | 免疫治療療效預測（需確認 PD-L1 表達于腫瘤細胞） |
B7-H3 | 共刺激分子，抑制 T 細胞活性 | 多種實體瘤的免疫逃逸研究 | |
代謝異常 | GLUT1 | 葡萄糖轉運體 1，腫瘤細胞無氧糖酵解增強 | 評估腫瘤細胞代謝活性（如肺癌、肝癌） |
藥物耐藥 | ABCG2 | ATP 結合盒轉運蛋白，泵出化療藥物 | 化療耐藥相關研究（如乳腺癌、卵巢癌） |
免疫細胞（腫瘤微環(huán)境中最核心的非腫瘤細胞群）：免疫細胞是 mIHC 分析的重點，需區(qū)分 “淋巴細胞、髓系細胞、固有免疫細胞" 等亞群，核心用于評估免疫浸潤狀態(tài)（如 “熱腫瘤 / 冷腫瘤" 判斷、免疫治療療效預測）。
細胞大類 | 具體亞群 | 核心標志物 | 輔助標志物（用于精細分型） | 功能 / 應用場景 |
淋巴細胞 | T 細胞（總群） | CD3 | - | 識別所有 T 細胞，基礎標志物（如腫瘤浸潤 T 細胞總量統(tǒng)計） |
輔助性 T 細胞（Th） | CD4 | CD3（確認 T 細胞） | 區(qū)分 Th 細胞（如 Th1/Th2/Th17，需加測功能標志物如 T-bet） | |
細胞毒性 T 細胞（CTL） | CD8 | CD3（確認 T 細胞） | 評估殺傷性 T 細胞浸潤（如 “CD8+T 細胞密度" 與預后關聯(lián)） | |
調節(jié)性 T 細胞（Treg） | Foxp3 | CD4、CD25（增強特異性） | 區(qū)分免疫抑制性 Treg（需排除 “活化 CD25+T 細胞"） | |
B 細胞（總群） | CD20 | PAX5（B 細胞核標志物，更穩(wěn)定） | 評估 B 細胞浸潤（如 tertiary lymphoid structures，TLS） | |
自然殺傷細胞（NK） | CD56 | CD16（增強特異性，排除神經(jīng)細胞） | 識別固有免疫殺傷細胞（如 NK 細胞對腫瘤的直接殺傷） | |
髓系細胞 | 總髓系細胞 | CD45+CD11b | - | 泛髓系標志物，需結合亞群標志物進一步分型 |
中性粒細胞 | Ly6G（小鼠）/ | CD11b（確認髓系） | 區(qū)分中性粒細胞（如 “中性粒細胞浸潤與炎癥相關腫瘤進展"） | |
單核細胞 / 巨噬細胞 | CD68（總巨噬細胞） | - | 識別所有巨噬細胞（不區(qū)分 M1/M2） | |
M1 型巨噬細胞（促炎） | iNOS | CD68（確認巨噬細胞） | 評估促炎巨噬細胞（如抗腫瘤免疫中的 M1 浸潤） | |
M2 型巨噬細胞（抑炎） | CD206（甘露糖受體） | CD68（確認巨噬細胞） | 評估免疫抑制性 M2 巨噬細胞（如腫瘤相關巨噬細胞 TAM） | |
樹突狀細胞（DC，總群） | CD11c | MHC-II（增強特異性） | 識別抗原提呈細胞 DC（如 DC 對 T 細胞的激活作用） | |
漿細胞樣 DC（pDC） | BDCA-2（人）/ | CD11c（確認 DC） | 評估 I 型干擾素分泌相關的 pDC（如抗病毒免疫） | |
其他固有免疫細胞 | 肥大細胞 | Tryptase（類胰蛋白酶） | CD117（c-Kit，輔助確認） | 識別肥大細胞（如過敏反應、腫瘤微環(huán)境炎癥調節(jié)） |
基質細胞（維持組織結構，參與微環(huán)境調控）：基質細胞是腫瘤微環(huán)境的 “支架"，包括成纖維細胞、肌成纖維細胞等，核心參與細胞外基質（ECM）合成、腫瘤侵襲調控，標志物特異性較高。
細胞類型 | 核心標志物 | 輔助標志物 | 功能 / 應用場景 |
成纖維細胞 | FAP（成纖維細胞活化蛋白） | - | 識別活化的成纖維細胞（如腫瘤相關成纖維細胞 CAF），參與 ECM 重塑 |
肌成纖維細胞 | α-SMA（α- 平滑肌肌動蛋白） | FAP（確認 CAF） | 區(qū)分肌成纖維細胞（收縮功能，如傷口愈合、腫瘤侵襲） |
成骨細胞 | Osteocalcin（骨鈣素） | Runx2（核標志物） | 識別成骨細胞（如骨肉瘤微環(huán)境、骨轉移灶） |
破骨細胞 | TRAP（抗酒石酸酸性磷酸酶） | CD68（確認髓系來源） | 識別破骨細胞（如骨腫瘤、骨質疏松相關研究） |
血管相關細胞（提供營養(yǎng)，參與腫瘤血管生成）：血管相關細胞包括內皮細胞、周細胞，核心用于評估腫瘤血管生成（如 “微血管密度 MVD"），是抗血管生成治療療效監(jiān)測的關鍵。
細胞類型 | 核心標志物 | 輔助標志物 | 功能 / 應用場景 |
血管內皮細胞 | CD31（血小板內皮細胞黏附分子） | CD34（更敏感，含淋巴管內皮） | 識別血管內皮細胞（金標準），計算 MVD（微血管密度） |
CD105（Endoglin） | CD31（確認內皮） | 識別 “活化的內皮細胞"（僅在新生血管表達，更特異） | |
淋巴管內皮細胞 | LYVE-1（淋巴管內皮透明質酸受體） | Podoplanin（平足蛋白） | 區(qū)分淋巴管與血管（如腫瘤淋巴轉移相關研究） |
周細胞 | PDGFR-β（血小板衍生生長因子受體 β） | α-SMA（部分周細胞表達） | 識別血管周細胞（維持血管穩(wěn)定性，如抗血管治療對周細胞的影響） |
其他輔助細胞（特殊功能細胞，按需選擇）：這類細胞在特定組織微環(huán)境中存在，需根據(jù)研究場景（如神經(jīng)內分泌腫瘤、肝臟疾病）選擇。
細胞類型 | 核心標志物 | 適用場景 |
神經(jīng)內分泌細胞 | Synaptophysin（Syn） / Chromogranin A（CgA） | 識別神經(jīng)內分泌腫瘤（如小細胞肺癌、神經(jīng)內分泌癌） |
肝細胞 | HepPar-1（肝細胞特異性抗原） | 識別肝細胞（如肝癌微環(huán)境、肝臟損傷研究） |
膽管上皮細胞 | CK19（細胞角蛋白 19） | 識別膽管上皮（如膽管癌、肝臟疾病中膽管損傷） |
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