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產品分類
Product Category詳細介紹
| 品牌 | absin | 貨號 | abs47047616 |
|---|---|---|---|
| 規格 | 10mL；50mL | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | 常用于細胞凋亡檢測及其它 | 應用領域 | 化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥,綜合 |
| 產品描述 | |
| 描述 | DAPI染色液(DAPI Staining Solution)是適用于常見細胞和組織細胞核染色的染色液。DAPI，即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride，也稱DAPI dihydrochloride，分子式為C16H15N5·2HCl，分子量為350.25，是可以穿透細胞膜的藍色熒光染料，和雙鏈DNA結合后可以產生比DAPI自身強20多倍的熒光，靈敏度高于EB。 DAPI染色常用于細胞凋亡檢測，染色后用熒光顯微鏡觀察或流式細胞儀檢測。DAPI也常用于普通的細胞核染色以及某些特定情況下的雙鏈DNA染色。DAPI的激發波長為340nm，發射波長為488nm，DAPI和雙鏈DNA結合后，激發波長為364nm，發射波長為454nm。 |
| 濃度 | 3μM |
| 使用方法 | 懸浮細胞： （1）收集懸浮細胞2×105 ~1×106個細胞，通過離心（通常300-500×g，5分鐘）沉淀細胞，棄上清； （2）加入1mL預冷PBS重懸細胞沉淀，再次離心洗滌，去除殘留的培養基和其他雜質； （3）（可選）使用4%多聚甲醛（PFA）或其他固定劑，在室溫下固定細胞5-15分鐘。然后用PBS清洗細胞2次，每次5分鐘，去除未結合的固定劑，對于保持細胞形態和結構特別有用。 （4）通過離心沉淀細胞，棄上清，加入1mL DAPI 染色液，輕輕混勻后，室溫避光孵育 5-15 分鐘。 （6）流式細胞術上機檢測（通常不需要清洗，多余的染色液不會顯著影響數據質量）；如果使用熒光顯微鏡觀察細胞，建議用PBS洗滌細胞2-3次以去除多余的DAPI染色液，在載玻片上滴一滴抗淬滅封片介質，覆蓋蓋玻片，避免產生氣泡。使用配備有 UV 或藍色激發光源（358 nm 左右）的熒光顯微鏡觀察，DAPI 的發射光譜峰值約為 461 nm，呈現亮藍色熒光。 貼壁細胞： （1）（可選）使用4%多聚甲醛（PFA）或其他固定劑，在室溫下固定細胞5-15分鐘。然后用PBS清洗細胞2次，每次5分鐘，去除未結合的固定劑，這一步驟非常重要，因為殘留的固定劑可能會影響后續染色的效果。 （2）（可選）使用通透化試劑（如 0.1% Triton X-100）來破壞細胞膜，在室溫孵育5-10分鐘，使抗體或其他染料更容易進入細胞內部。然后用PBS再次清洗細胞3次。 （3）吸去最后一次洗滌用的PBS，滴加適量的 DAPI 染色液，輕輕搖晃以確保均勻覆蓋所有細胞。室溫避光孵育5-15分鐘。 （4）孵育結束后，用PBS輕輕洗滌細胞2-3次，以去除多余的DAPI染料。注意不要過度洗滌以免損傷細胞或造成染料脫失。 （5）使用熒光顯微鏡觀察細胞，在載玻片上滴一滴抗淬滅封片介質，覆蓋蓋玻片，避免產生氣泡。使用配備有 UV 或藍色激發光源（358 nm 左右）的熒光顯微鏡觀察，DAPI 的發射光譜峰值約為 461 nm，呈現亮藍色熒光。 |
| 儲存/保存方法 | -20℃，避光，有效期12個月。 |
| 注意事項 | 1、熒光染料都存在淬滅的問題，建議染色后盡快檢測。 2、避免反復凍融，否則容易失效。 3、DAPI對人體有刺激性，請注意適當防護。 4、為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。 |
| 基本信息 | |
| 別名 | DAPI Staining Solution |
| 外觀 | 二甲基甲酰胺溶液 |
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