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簡(jiǎn)要描述：膠原蛋白I型（鼠尾）是根據(jù)Birkedal-Hansen 方法，通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀等步驟制備。可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿，培養(yǎng)細(xì)胞表面粘附性，特別適合那些在普通培養(yǎng)器皿表面不易貼壁的細(xì)胞，比如成纖維細(xì)胞、肝細(xì)胞等原代細(xì)胞。還可用于三維膠的制備，模擬真實(shí)的生長(zhǎng)環(huán)境，使得細(xì)胞在三維環(huán)境中生長(zhǎng)。
產(chǎn)品型號(hào)：abs47014921廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家更新時(shí)間：2025-11-05訪 問 量：2200產(chǎn)品分類
Product Category詳細(xì)介紹
| 品牌 | absin | CAS | 9007-34-5 |
|---|---|---|---|
| 貨號(hào) | abs47014921 | 規(guī)格 | 2ml;10ml |
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 主要用途 | 可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿,培養(yǎng)細(xì)胞表面粘附性,特別適合那些在普通培養(yǎng)器皿表面不易貼 |
| 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),農(nóng)林牧漁,制藥/生物制藥,綜合 |
膠原蛋白I型（鼠尾）
| 產(chǎn)品描述 | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 描述 | 膠原蛋白是結(jié)締組織和內(nèi)臟器官細(xì)胞外基質(zhì)的主要構(gòu)造成分，但在皮膚、肌腱、骨骼中分布最為廣泛。從遺傳和結(jié)構(gòu)上膠原蛋白分為許多類型。膠原蛋白I（Collagen, Type I）是由2 個(gè)α1 鏈和1 個(gè)α2 鏈組成的異源多聚體，在37℃，中性pH 下自發(fā)形成三螺旋骨架，是一種優(yōu)秀的細(xì)胞培養(yǎng)用基質(zhì)，廣泛用于肝細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、脊神經(jīng)節(jié)、肌肉細(xì)胞、施萬細(xì)胞、胚肺細(xì)胞、上皮細(xì)胞和其他大量細(xì)胞系。還能用于研究細(xì)胞生長(zhǎng)、分化、遷移以及發(fā)育過程中的組織形態(tài)發(fā)生。 鼠尾膠原蛋白I 是根據(jù)Birkedal-Hansen 方法，通過醋酸抽提、氯化鈉沉淀、磷酸氫二na沉淀等步驟制備。可用于包被細(xì)胞培養(yǎng)器皿，培養(yǎng)細(xì)胞表面粘附性，特別適合那些在普通培養(yǎng)器皿表面不易貼壁的細(xì)胞，比如成纖維細(xì)胞、肝細(xì)胞等原代細(xì)胞。還可用于三維膠的制備，模擬真實(shí)的生長(zhǎng)環(huán)境，使得細(xì)胞在三維環(huán)境中生長(zhǎng)。 本品為溶于6mM HAc 的無菌溶液，濃度5mg/ml，每個(gè)批次產(chǎn)品皆通過細(xì)胞培養(yǎng)測(cè)試（包括三維空間培養(yǎng)）以保證質(zhì)量的可靠性。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 濃度 | 5mg/mL | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 使用方法 | 一、細(xì)胞培養(yǎng)器皿的表面包被： 組織培養(yǎng)器皿的表面包被推薦濃度為1-5μg/cm2，起始濃度可shou選5μg/cm2。建議根據(jù)具體細(xì)胞類型來優(yōu)化。 1、6mM HAc 稀釋液的制備 本品以溶于6mM HAc（=0.36g/L HAc）的無菌溶液形式提供，本身不溶于中性pH，建議用6mM HAc 溶液做進(jìn)一步稀釋。 配制方法：取34.5μL 冰醋酸（17.4 M）加入100ml 雙蒸水，充分混勻后即得到6mM HAc 溶液，0.22μm 濾膜過濾除菌后待用。 2、包被步驟 （1）根據(jù)自身實(shí)驗(yàn)體系以及優(yōu)化后的包被濃度來計(jì)算所需的膠原蛋白量，并加入相應(yīng)孔內(nèi)，確保膠原蛋白溶液wan全覆蓋表面。 ①以包被濃度為5μg/cm2，先用6mM HAc 稀釋液將膠原蛋白（5mg/mL）稀釋到合適的中間濃度，50μg/mL，然后參考表1 不同培養(yǎng)皿內(nèi)膠原蛋白加量表 來加量到各孔內(nèi)； ②以包被濃度為2μg/cm2，先用6mM HAc 稀釋液將膠原蛋白（5mg/mL）稀釋到合適的中間濃度，12μg/mL，然后參考表1 不同培養(yǎng)皿內(nèi)膠原蛋白加量表來加量到各孔內(nèi)； 表1 不同培養(yǎng)皿內(nèi)膠原蛋白加量表
二、三維膠原的制備： 當(dāng)鼠尾膠原蛋白I 使用濃度>1mg/mL，pH 7.0 左右皆可形成具有一定強(qiáng)度的三維膠，建議成膠濃度為1-2mg/mL。 由于本品是以溶于6mM HAc 的無菌溶液形式提供，在成膠過程需先加入0.06 倍體積的0.1M NaOH 中和。 1、需要溶液準(zhǔn)備（無菌、預(yù)冷） 10×PBS（可含酚紅）或10×細(xì)胞培養(yǎng)液 0.1M NaOH 雙蒸水 2、三維膠原制備（不含細(xì)胞）（以配制1mL，1mg/mL 三維膠為例）： （1）取200μL 膠原蛋白（5mg/mL）加到置于冰浴的離心管內(nèi)，加入690μL 無菌水。之后加到12μL 0.1M NaOH【注意：該步驟不能反，如果反過來把12μL 0.1M NaOH 加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH 不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)】，立即混勻。再加入100μL 10×PBS 或10×細(xì)胞培養(yǎng)液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中【注意：混勻后pH 為7.0 左右，如果PBS 或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時(shí)需要用pH 試紙測(cè)試】 （2）將培養(yǎng)器皿在室溫（25℃左右）放置20min 待膠凝固后，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱內(nèi)。【注意】：如果配制中使用的是10×PBS，需要在做細(xì)胞培養(yǎng)前，先加入適當(dāng)體積的細(xì)胞培養(yǎng)液預(yù)平衡。 3、三維膠原制備（含細(xì)胞）（以配制1mL，1mg/mL 三維膠為例）： （1）準(zhǔn)備好細(xì)胞懸液，并放置于冰浴中。 （2）將200μL 膠原蛋白（5mg/mL）加到12μL 0.1M NaOH【注意：該步驟不能反，如果反過來把12μL0.1M NaOH加到膠原溶液中，會(huì)由于NaOH 不能迅速混勻而產(chǎn)生局部的膠原凝結(jié)】，立即混勻。再加入23μL 10×PBS 或者10×細(xì)胞培養(yǎng)液，立即混勻【注意：混勻后pH 為7.0 左右，如果PBS 或培養(yǎng)液中沒有加酚紅，初次使用時(shí)需要用pH試紙測(cè)試】。再加入760μL 的細(xì)胞懸浮液，混勻后立即加到培養(yǎng)器皿中。 （3）將培養(yǎng)器皿在室溫（25℃左右）放置20min 待膠凝固后，加入適當(dāng)體積細(xì)胞培養(yǎng)液，轉(zhuǎn)移到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 儲(chǔ)存/保存方法 | 2-8℃保存，不可凍存，有效期12個(gè)月。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 注意事項(xiàng) | 1、整個(gè)操作請(qǐng)于冰上進(jìn)行，因室溫鼠尾膠原I 可迅速成膠，操作過程盡量保持低溫。 2、整個(gè)操作請(qǐng)?jiān)跓o菌環(huán)境下無菌操作，避免污染以影響細(xì)胞生長(zhǎng)。 3、為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。 | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| 基本信息 | |||||||||||||||||||||||||||||||||
| 外觀 | 溶液 |
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