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Product Category詳細介紹
| 品牌 | absin | 貨號 | abs9239 |
|---|---|---|---|
| 規格 | 100ml | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | 用于PAGE,Western,免疫沉淀和免疫共沉淀 | 應用領域 | 化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥,綜合 |
免疫印跡及免疫沉淀用裂解液
| 產品描述 | |
| 描述 | Western及IP細胞裂解液,是一種在非變性條件下裂解細胞的裂解液。本細胞裂解液裂解的細胞,可以用于PAGE,Western,免疫沉淀和免疫共沉淀。使用本裂解液時,用戶可以根據具體用途自行添加特定抑制劑或者不添加抑制劑。 |
| 使用方法 | 1、對于培養細胞樣品 (1)取適當量的裂解液,根據需要自行確定添加適當的抑制劑或不添加抑制劑。 (2)對于貼壁細胞:去除培養液,用 PBS、生理鹽水或無血清培養液洗一遍(如果血清中的蛋白沒有干擾,可以不洗)。按照 6 孔板每孔加入 100~200uL 裂解液的比例加入裂解液。用槍吹打數下,使裂解液和細胞充分接觸。通常裂解液接觸細胞 1~2sec 后,細胞就會被裂解。 (3)對于懸浮細胞:離心收集細胞,用手指把細胞用力彈散。按照 6 孔板每孔細胞加入 100~200uL裂解液的比例加入裂解液。再用手指輕彈以充分裂解細胞。充分裂解后應沒有明顯的細胞沉淀。如果細胞量較多,必需分裝成 5~10×105 細胞/管,然后再裂解。大團的細胞較難裂解充分,而少量的細胞由于裂解液容易和細胞充分接觸,相對比較容易裂解充分。 (4)充分裂解后,10000~14000g 離心 3~5min,取上清,即可進行后續的 PAGE、Western、免疫沉淀、免疫共沉淀、酶或生物小分子檢測等操作。 注:裂解液用量說明:通常 6 孔板每孔細胞加100uL 裂解液已經足夠,但如果細胞密度非常高可以適當加大裂解液的用量至 150uL 或 200uL。 2、對于組織樣品 (1)取適當量的裂解液,根據需要自行確定添加適當的抑制劑或不添加抑制劑。 (2)把組織jian切成細小的碎片。 (3)按照每 20mg 組織加入 100~200uL 裂解液的比例加入裂解液。 (如果裂解不充分可以適當添加更多的裂解液,如果需要高濃度的蛋白樣品,可以適當減少裂解液的用量。) (4)用玻璃勻漿器勻漿,直至充分裂解。 (5)充分裂解后,10000~14000g 離心 3~5min,取上清,即可進行后續的 PAGE、Western、免疫沉淀和免疫共沉淀等操作。 (6)如果組織樣品本身非常細小,可以適當剪切后直接加入裂解液裂解,通過強烈 vortex 使樣品裂解充分。然后同樣離心取上清,用于后續實驗。直接裂解的優點是比較方便,不必使用勻漿器,缺點是不如使用勻漿器那樣裂解得比較充分。 |
| 儲存/保存方法 | -20℃凍存,有效期12個月。 |
| 注意事項 | 1、若頻繁使用本品,可以短期4℃保存。若不是頻繁使用本品,建議第一次使用本品的時候將裂解液分裝凍存,避免反復凍融。 2、若需添加蛋白酶或磷酸酶抑制劑,可使用我司的廣譜蛋白酶抑制劑混合物(abs9161),廣譜磷酸酶抑制劑混合物(abs9162),以及PMSF,或者自行準備。 3、裂解樣品的所有步驟需在冰上或4℃進行。 4、為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。 |
| 基本信息 | |
| 外觀 | 溶液 |
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