
簡要描述:Thrombin來源于牛血漿,分子量37KD,是由兩條肽鏈(31KD和6KD)通過二硫鍵組成的。纖維蛋白酶是蛋白質(zhì)水解酶,其催化纖維蛋白原(Fibrinogen)水解掉A肽和B肽,由此形成纖維蛋白單體,單體進一步聚合,在血小板、紅細胞和白細胞等參與下形成血凝塊。
產(chǎn)品分類
Product Category詳細介紹
| 品牌 | absin | 貨號 | abs47047374 |
|---|---|---|---|
| 規(guī)格 | 1000U | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
| 主要用途 | 應用于基因工程產(chǎn)品的開發(fā) |
| 產(chǎn)品描述 | |
| 描述 | Thrombin來源于牛血漿,分子量37KD,是由兩條肽鏈(31KD和6KD)通過二硫鍵組成的。凝血mei是凝血mei原(凝血因ziⅡ)激活后形成的蛋白質(zhì)水解酶,其催化纖維蛋白原(Fibrinogen)水解掉A肽和B肽,由此形成纖維蛋白單體,單體進一步聚合,在血小板、紅細胞和白細胞等參與下形成血凝塊。 產(chǎn)品特點: 1、純度高:SDS-PAGE檢測圖譜無雜蛋白條帶; 2、比活高:比活力大于2000單位/mgpr; 3、不含有其他蛋白酶活性; 4、滅活病毒:生產(chǎn)過程中采用S/D法和干熱法兩步滅活病毒; 5、產(chǎn)品穩(wěn)定性好:凍干產(chǎn)品在室溫條件下考察12個月,酶活力未見顯著變化,冷藏條件下保存36個月,酶活力未見顯著變化。 |
| 來源 | 牛血漿 |
| 純度 | 2000U/mg |
| 使用方法 | (一)融合蛋白切割 由于凝血mei具有切割序列專一性強,水解效率高的特點,它被廣泛地應用于基因工程產(chǎn)品的開發(fā),其應用之一是作為工具蛋白酶用于重組融合蛋白質(zhì)的特異性斷裂,尤其適用于生物工程制藥業(yè)及基因工程、生物化學、分子生物學等研究。 凝血mei是一種廣泛用于切割標簽的蛋白酶,能夠有效切質(zhì)量比僅為1:2000的蛋白。切割可在20℃到37℃之間切割0.3到16小時。凝血mei最佳的切割位點是X4-X3-P-R[K]-X1'-X2',這里X4 和 X3 是疏水氨基酸而X1'和 X2'是非酸性氨基酸,一些經(jīng)常使用的識別位點是L-V-P-R-G-S,L-V-P-R-G-F,和MY-P-R-G-N。在X4-X3-P-R-G-X2'之間切割比在X4-X3-P-K-L-X2'更有效。其他識別位點是 X2-R[K]-X1', 這里X2 或者 X1'是甘氨suan,例如A-R-G和G-K-A,這里切割發(fā)生在第二個殘基后。在凝血mei切割位點和N末端標簽之間插入五個甘氨suan殘基可改善切,通過這一"甘氨suan連接肽"只需較少酶量就可達到wan全切割,而且也可以避免可能發(fā)生的錯誤切割。有效的消化緩沖液是20mM Tris-HCl緩沖液,含150mM氯化鈉,pH8.0。凝血mei可從切割產(chǎn)物中用p-氨基瓊脂糖親和純化,或者苯甲脒瓊脂糖移去。 (二)血小板聚集試驗 凝血mei與血小板表面的凝血mei受體結(jié)合,活化血小板,使血小板粘附和聚集。 血小板聚集實驗參照文獻:兔血用塑料管收集和用ACD(86 mmol/L檸檬酸鈉,111 mmol/L葡萄糖,53 mmol/L檸檬酸)0.15體積比抗凝,200 g離心10 min,離心2次,取上清,800g離心15 min。沉淀中加Tyrode—Hepes緩沖液(140 mmol/L NaCl,5 mmol/L KCl,1 mmol/L MgCl2,10 mmol/L Hepes,10mmol/L葡萄糖,pH 7.4)調(diào)節(jié)至血小板數(shù)為(3~4)×1011/L。血小板聚集用血液凝集儀來測定。血小板懸液(0.2ml )與藥物溫育1 min,然后用凝血mei(500 u/L)作用5 min,記錄聚集情況。 |
| 儲存/保存方法 | 2-8℃,避光防潮密閉干燥,有效期3年。 |
| 技術指標 | 儲備溶液可在0.1%(w/v)BSA溶液中以100單位/ml的濃度制備。儲備溶液在0–5°C下保持活性一周。由于凝血mei溶液吸附到玻璃上,因此建議將溶液等份放入塑料管中,并在-20°C下儲存,以便長期儲存。 BSA使用水或PBS配置溶液 |
| 基本信息 | |
| 別名 | Thrombin from bovine plasma |
| 外觀 | 白色凍干粉或塊狀物 |
| 可溶性/溶解性 | H2O: 1 mL/vial clear to slightly |
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