產品簡介: 

該產品是我們研發團隊在貼壁細胞質粒DNA轉染試劑的基礎上進一步優化研發成功的專門用于懸浮細胞質粒DNA轉染的試劑。它具有非常zhuo越的轉染性能，可高效轉染多種懸浮細胞，轉染效率在懸浮細胞中可高達85%以上（巨噬細胞、EGFP質粒）。與目前市場上常見的脂質體轉染試劑不同，它采用生物可降解材料配制，對細胞的毒性很低，轉染后細胞死亡率不到10%。其使用也非常方便，先將轉染試劑與質粒DNA混合，再將轉染試劑-DNA復合物直接加入培養細胞中，血清不影響其轉染效果，不必刻意添加或更換培養液，操作十分簡便。

產品特點：

 1、zhuo越的細胞轉染性能：可高效轉染多種懸浮細胞，轉染效率可高達85%以上；

 2、極低的細胞毒性：使用可降解生物材料，細胞毒性低，轉染細胞死亡率不到10%，大大降低了因細胞毒性對實驗結果的影響，實驗結果更為客觀；

3、操作簡便，可用于含血清培養基培養細胞的轉染，轉染前后不需要更換培養液。

操作步驟 （以24 孔板轉染為例）:

A、 細胞接種:

1、 轉染前一天或者兩天接種細胞，接種細胞量為2-4×10 5 個。

2、 確保轉染時細胞比活度為90%以上，且生長狀態良好。

3、 如果細胞在轉染前一天鋪板，轉染時可以不用換液，如果細胞在轉染前兩天鋪板，轉染時最好換液。

B、 SP/DNA轉染復合物制備(該步完成后應立即進行轉染):

1、 在1.5 ml無菌離心管中加入50 ul Trans buffer，再加入適量的DNA，見附表。用移液器輕輕混勻成DNA稀釋液。

2、使用前用移液器吹打混勻轉染試劑，立即往DNA稀釋液中加入適量的轉染試劑，用移液器輕輕混勻。

3、 將SP/DNA復合物室溫靜置15分鐘后，立即轉染。
注意：離心管最好使用聚丙烯離心管。

C、轉染:

1、將擬轉染細胞強烈振蕩20-40秒，確保培養細胞分散成單細胞懸液，無細胞結團；

2、將步驟B制備的轉染復合物滴加至培養基中，邊加邊輕輕晃動培養板。加完后，立即將培養板轉入培養箱繼續培養。

3、 培養24-96小時后收獲。

4、 SP在wan全培養基中仍有較高的轉染效率，因此轉染前后不需要換成無血清或低血清培養基。因收獲蛋白需要，可以使用懸浮細胞培養專用的無血清培養基。

附表：不同培養體系推薦初始轉染條件

2-8℃避光保存，Trans buffer可保存于2-8℃有效期一年，使用前請先將本品輕輕混勻。

1、對于24孔板，轉染前接種細胞量以（2-4）x105細胞為宜，轉染時細胞生長狀態應保持良好，不要有支原體污染。