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詳細介紹
| 品牌 | absin | 貨號 | abs50010 |
|---|---|---|---|
| 規格 | 500T | 供貨周期 | 現貨 |
| 主要用途 | 用于細胞增殖和細胞毒性的檢測 | 應用領域 | 化工,生物產業,農林牧漁,制藥/生物制藥,綜合 |
MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
| 產品描述 | |||||||||||||||||
| 描述 | MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒可用于細胞增殖和細胞毒性的檢測。MTT可被線粒體內的一些脫氫酶還原生成結晶狀的深紫色產物甲瓚。在特定溶劑存在的情況下，可被wan全溶解。然后通過酶標儀可以測定570nm波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快，則吸光度越高；細胞毒性越大，則吸光度越低。
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| 使用方法 | 一、試劑準備： MTT 溶液的配制：用 5mL MTT 溶劑溶解 25mg MTT，配制成 5mg/mL 的MTT 溶液。在無菌環境下，用 0.22µm 過濾后使用，或適當分裝后-20°C 避光保存，保存期為半年，在2~8°C 避光保存 2 周。 二、操作流程： 1、實驗所用細胞應為對數生長期細胞。檢測時，應設置 MTT 溶劑對照孔（不含細胞）。 2、用分光光度計在 690nm 處測量 96 孔板的背景吸光度值。 3、通常細胞增殖實驗每孔加入 100µL 2000 個細胞，細胞毒性實驗每孔加入100µL 5000 個細胞(具體每孔所用的細胞的數目，需根據細胞的大小，細胞增殖速度的快慢等決定)。按照實驗需要，進行培養并給予 0~10µL 特定的藥物刺激。 4、每孔加入 10µL MTT 溶液，在細胞培養箱內孵育 4h。 5、孵育結束后，從培養箱中取出細胞，每孔加入 100µL 甲瓚溶解液。在細胞培養箱內繼續孵育，期間可用加樣槍吹打幫助溶解。直至甲瓚全部溶解。通常 37°C 孵育5~10min 左右。注：加入甲瓚溶解液后，1h 之內讀板。 6、用分光光度計在 570nm 測定吸光度。所測的值減去 690nm 處測得的背景吸光度值，即為實際吸光度值。 | ||||||||||||||||
| 注意事項 | 1、由于使用 96 孔板進行檢測，如果細胞培養時間較長，一定要注意蒸發的問題。一方面，由于 96 孔板周圍一圈最容易蒸發，可以采取棄用周圍一圈的辦法，改加PBS，水或培養液；另一方面，可以把 96 孔板置于靠近培養箱內水源的地方，以緩解蒸發。 2、MTT 溶劑在低溫情況下會凝固，使用前請室溫放置或 20-25°C 水浴溫育片刻至全部融解后使用。 3、MTT 配制成溶液后為黃色，需避光保存，長時間光照會導致失效。當顏色變為灰綠色時，請勿使用。MTT 溶液在 2~8°C、冰浴等較低溫度情況下會凝固，可以20-25°C 水浴溫育片刻至全部融解后使用。 4、甲瓚溶解液結凍或產生沉淀時可以 37°C 水浴孵育以促進溶解，并且必須在全部溶解并混勻后使用。 5、細菌、支原體或其他微生物可破壞 MTT 四唑環，污染的細胞不能使用該方法進行檢測。 6、加入甲瓚溶解液時，高蛋白含量的樣本可能會形成沉淀。樣本的蛋白濃度相當于10%胎牛血清（4mg 蛋白質/mL 樣品）是可以接受。含高蛋白濃度的血清或血清產品需要稀釋后檢測。 7、含有酚紅的培養基和鹽溶液可提高的背景吸光度值，降低靈敏度。 | ||||||||||||||||
| 基本信息 | |||||||||||||||||
| 別名 | MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit,MTT kit | ||||||||||||||||
| 儲存/保存方法 | 2~8℃，避光保存，有效期12個月。 |
| 研究領域 | |
| 研究領域 | Drug DiscoveryAntibody DrugTarget Screening and IdentificationTarget Screening |
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